Ach ja, spicken im Internet zählt nicht.

Und ja, meine DSLR ist zuhause, hatte nur mein Handy zur Hand..

Werden damit nicht Farben im Baumarkt gemischt?!

Hat für mich ein CSI-Feeling
Also weniger Farben mischen, sondern eher Proben analysieren.... Aber kann auch total daneben liegen

Ein Sortierer...;) Steht hier am Inselspital auch rum. Schade das für die Analyse keinen Mac habt. Aber dafür nimmst du sicher deinen?

zellen sortieren wo arbeitest du denn?

Touni
Ah dann gehst du zu Bernadette sortieren?
Zur Analyse haben wir auch Mac's bei uns mit FlowJow drauf. Allerdings gibts bei nem FACS Sort eigentlich nichts gross zu analysieren.
Macht auch keinen Sinn, denn das Gating das ich am Aria setze, bekommste im FlowJow eh nie mehr hin..

peppermind
An der ETH in Zürich. Bin hier als Laborant für das Labormanagement meiner Gruppe sowie als Operator für den oben gezeigten FACSaria
und noch einen FACScanto zuständig.

Glueh
Fast! Bei CSI (frag mich nicht mehr welche Folge) kam auch mal ein FACS zum Einsatz. Allerdings nur ein analyse Gerät. Mit meinem Teil kann
ich neben reinem analysieren auch noch Zellpopulationen separieren auf maximal vier Auffanggefässe.

Und das Ding unter dem Tisch ist eine HP Workstation

..mit nem Pentium 4 drin...

Schattenmantel

ich dachte Du kannst von der Konzertfotografie leben....?

Also wenn ihr mich fragt ist das ein Analyse gerät das irgend welche Farben analysiert

und wie falsch liege ich

MacRabbitPro

Oh das wäre toll wenn ich das könnte. Leider bin ich davon noch sehr weit entfernt.
Auch wenn ich mittlerweile ca. 50-60 Konzerte pro Jahr fotografiere hab ich noch so gut wie keine regelmässigen
Publikationen (das kommt erst so langsam..) und Geld dafür bekommen ist nochmals ein anderes Thema.

Ich hoffe das ich ab August (dann arbeite ich nur noch 80% im Labor) anfange Aufträge fürs Fotostudio zu bekommen..
Hochzeiten, Paarshootings, Promotionshoots für Bands etc..

alli

Wie schon oben geschrieben, es ist kein reines Analyse Gerät, sondern ein Gerät das Zellen sortiert nachdem es sie optisch analysiert hat.

Die Optik im Gerät ist mit zwei LED Lasern aufgebaut (488n & 603nm), welche die Zellen anstrahlen. Das Streulicht (180° und 90°) wird dann über
mehrere Photomultiplier (eigentlich nicht gross was anderes als nen Sensor in ner Digicam) analysiert und gibt entsprechende Signale die ich
über verschiedene Plots darstellen kann.

So kann ich Zellen aufgrund der Merkmale (Grösse, Komplexität, Fluoreszenz) analysieren und anschliessend sortieren.
Und das tolle daran, das Gerät kann das bis zu 50'000 mal pro Sekunde. *g*

Für diejenigen die es interessiert, hier ist ein einfaches Schema wie das funktioniert.

Bild von www.bio.davidson.edu

nee dumme frage von was für Zellen reden wir hier ???

Von der Hersteller-Website:

Das BD FACSAria-Durchflusszytometer ist Hochgeschwindigkeitssorter im "Benchtop"-Format. Es können bis zu 70.000 Ereignisse pro Sekunde aufgenommen werden. Mit seiner fixierten Optik und einer digitalen Elektronik ermöglicht das Gerät die gleichzeitige Analyse von bis zu 9 Fluoreszenzkanälen plus zwei Scatter-Parametern. Drei Laser mit Anregungswellenlängen von 407, 488 und 633 nm stehen zur Verfügung.

alli

Eukariotische Zellen. Das sind Zellen von Säugetieren.
In unserem Fall sind das vorwiegen Maus- und Humangewebe welche das Ausgangsmaterial für die Forschung bei uns sind.

Meine Gruppe forscht im Bereich von Krebs und Entzündungsabläufen. Ich hab aber viele "Kunden" die von extern unseren
Service in Anspruch nehmen. Das speziellste was ich bis jetzt sortiert habe war eine Probe von einem Neurosyphillis Patienten..
Da galt es sehr umsichtig zu arbeiten, da dieses Material entsprechend infektiös war.

MFG

Ich hatte doch gesagt nicht spicken.
Aber ja, korrekt. Wobei die Angabe mit 70'000 Ereignissen (events) pro Sekunde optimistisch angesetzt ist. Realistisch lassen sich rund 50'000 events pro Sekunde mit brauchbaren Resultaten sortieren.

Unser Gerät ist mit einem 488er und einem 633er Laser ausgestattet.
Hätte zwar gerne noch nen 407er Laser für mehr Anwendungsmöglichkeiten (DAPI, Hoechst und Pacific Blue Färbungen), kostet aber leider ca. 60'000 Franken das nachzurüsten..

Eine schöne Methode. Ich hab mit einem rudimentären Vorläufer dieser Maschine in den Jahren 1994-1996 gearbeitet (Charakterisierung von apoptotischen Zellen über defekte Mitochondrien), Zur Auswertung haben wir damals ein Programm benutzt, das unter OS/2 lief. Das war bisher das einzige Mal, daß ich dem Mac untreu war

huxlipux

Das müsste dann ein Calibur oder LSR gewesen sein bei dir..
Oder sogar noch eins der ganz alten Geräte bei dem alles über Oszilloskope eingestellt wurde? (fällt der Name dieser ganz alten Baurreihe nicht mehr ein..)

Das war noch so ein Teil mit Oszilloskop. Vielleicht finde ich auf dem Dachboden noch ein Foto von der Maschine.

huxlipux

Dann war es ein Vantage (ist mir vorhin wieder eingefallen..).
An dem hab ich zwar nie als Operator gesessen, aber vor ca. 5 Jahren mehrfach Zellen auf 96w Platten sortieren lassen.
Damals hätte ich nie gedacht das es mal meine Hauptaufgabe sein wird als Operator in der FACS Technologie zu arbeiten.
Vielmehr hätte ich damals gedacht das ich in der Molekularbiologie lande, soviel wie ich mit Plasmiden kloniert habe.

Zellbiologie macht mehr Spaß und stinkt nicht so sehr, wie dieser ganze E.coli Mist. Ich hab am Ende meiner Arbeit ein kleines bischen Molekularbiologie gemacht (DD-RT PCR) und Gelshift Assays für Transkriptionsfaktoren, aber richtig gemocht hab ichs nie. Arbeiten an Zellkulturen lagen mir da eher.

Ich mag eigentlich beides gerne.. daher freu ich mich auch schon darauf das ich demnächst wieder Mäuse genotypisieren darf.
Trotzdem liegt mir der technische Aspekt vom cell sorting mehr da dort nicht neben biologischem Wissen eben auch sehr viel
technisches Verständnis für den optischen und elektronischen Aufbau des FACS gefragt ist.

Man kann zwischen FACS und Fotografie halt so schön viele Parallelen ziehen.. Laser (Lichtquelle..), Zellen (zu fotografierende Objekte),
LowPass, BandPass und HiPass Filter, Photomultiplier.. alles dinge die in vergleichbarer Funktion auch in der Fotografie vorkommen.